原位杂交：实验手册

----- In Situ Hybridization：Laboratory Companion

出版： Chapman & Hall.

索书号： Q32-62/I-59/1996/Y

藏书地点：武大外教中心

原位杂交（in situ hybridization）将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交，称为原位杂交。使用DNA或者RNA探针来检测与其互补的另一条链在细菌或其他真核细胞中的位置。

RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。其基本原理是：在细胞或组织结构保持不变的条件下，用标记的已知的RNA核苷酸片段，按核酸杂交中碱基配对原则，与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合（杂交），所形成的杂交体 (Hybrids）经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mRNA、rRNA和tRNA分子。RNA原位杂交技术经不断改进，其应用的领域已远超出DNA原位杂交技术。尤其在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定量分析，已成为最有效的分子病理学技术，同时在分析低丰度和罕见的mRNA表达方面已展示了分子生物学的一重要方向。

FISH是原位杂交技术大家族中的一员，因其所用探针被荧光物质标记（间接或直接）而得名，该方法在80年代末被发明，现已从实验室逐步进入临床诊断领域。基本原理是荧光标记的核酸探针在变性后与已变性的靶核酸在退火温度下复性；通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象（即维持其原位）的前提下对靶核酸进行分析。DNA荧光标记探针是其中最常用的一类核酸探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的DNA进行染色体及基因水平的分析。荧光标记探针不对环境构成污染，灵敏度能得到保障，可进行多色观察分析，因而可同时使用多个探针，缩短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。

《原位杂交—实验手册》一书于1996年由Chapman & Hall出版，作者Melody Clark。

《原位杂交—实验手册》一书主要内容分成六个章节：第一章讲述了整个染色体的基因组原位杂交和基因组分析，基因组的原位杂交应用，染色体的行为以及减数分裂，基因组原位杂交，dna探针的制备，原位杂交的实验步骤以及注意事项。第二章讲述了荧光原位杂交：基因图谱和临床诊断应用，分析了几种原位杂交的特点，以及在临床上的诊断应用，包括实验结果分析。第三章介绍核酸检测（DNA和RNA）单个分子标记原位杂交：两种传统原位杂交方法的选择。第四章讲述免疫荧光和细胞遗传学作为初学者的实验工具：原位杂交技术与免疫荧光技术相结合。第五章的主要内容是完整胚胎的原位杂交和组织切片的原位杂交：mRNA检测以及发育研究中的应用。第六章讲述了电子显微镜水平的原位杂交技术，电子显微镜水平的原位杂交技术满足了更高的实验要求。

《原位杂交—实验手册》作为一本实验工具书，语言简单易懂，实验步骤详细，结果分析清楚，还包括一些其他的特点：

1、本书是介绍原位杂交试验技术的专业书籍，从，试验原理，试验目的，试验材料，试验步骤，试验结果分析五个方面详细讲述，读者可以作为实验指导参考书阅读。

2、本书除了对原位杂交技术的介绍，还分析了多种原位杂交技术的优点和缺点，便于读者做出正确的实验选择。

3、本书最鲜明的特点就是，图片生动形象，语言浅显易懂。语言介绍的同时，附上可以说明问题的图片，本来复杂枯燥的实验技术变得简单易懂，增加了本书的趣味性，对于初学者有很大的帮助。

4、在本书的开始，将出现的专业词汇都罗列出来，按照英文字母的顺序排列，并予以注解，大大方便了大家对阅读过程中对原位杂交实验研究的专业术语的认知。

总的说来，《原位杂交—实验手册》一书为想要了解原位杂交技术的人员提供了清晰的指导路径，作为生物学的一本实验技术手册，是一本值得为想要涉足该领域的人员推荐的专业书籍。

本书目录：

前言

第一章整个染色体的基因组原位杂交和基因组分析

第二章荧光原位杂交：基因图谱和临床诊断应用

第三章核酸检测（DNA和RNA）单个分子标记原位杂交：两种传统原位杂交方法的选择

第四章免疫荧光和细胞遗传学作为初学者的实验工具：原位杂交技术与免疫荧光技术相结合。

第五章完整胚胎的原位杂交和组织切片的原位杂交：mRNA检测以及发育研究中的应用

第六章电子显微镜水平的原位杂交技术

索引

（武汉大学生命科学学院研究生张英）