转基因技术—原理与实验方案
----- Transgenesis
Techniques: Principles
and Protocols
出版: 科学出版社; 第1版
索书号: Q953/T772c(3)/2012/Y
藏书地点: 武大外教中心
当人类基因组序列全部被破解之后,学界所面临的主要挑战之一就是如何明确20000 至25000个编码蛋白质的基因的功能。这本书对目前所用在体内研究基因功能的基因修饰技术做了详细的介绍。
得益于转基因技术,小鼠迄今为止已经称为研究哺乳动物基因功能最受欢迎的模式动物,这不仅是因为小鼠的基因组与人类较为相近,而且由于小鼠的生理特征、解剖结构在某种程度上与人类相似。虽然本书大部分的篇幅主要是介绍小鼠的转基因技术,但小鼠并非唯一的模式生物。其他一些模式动物如果蝇,线虫、爪蟾、斑马鱼和大鼠,在胚胎发育、基因的生理功能及人类疾病基因的功能研究中都发挥着非常重要的作用,在转基因研究中也经常用到。本书中对于以上每种模式动物的转基因,都专门安排了一个章节进行介绍,详细介绍了动物的繁殖、构建载体、基因转入等,在介绍经典转基因技术的同时也介绍了最新发展起来的方法。
《转基因技术—原理与实验方案》一书于2012年由科学出版社出版,作者Cartwright E.J.。本书用大部分的章节介绍了通过将外源DNA注射入受精卵的原核和基于在胚胎干细胞进行同源重组打靶技术的基因修饰小鼠的制作,该部分内容是专门为这本新版《转基因技术:原理与实验方案》编写的,涵盖了该领域内的最新进展。主要介绍了构建转基因载体的最佳方案和策略、详尽的原核显微注射技术及相关的外科手术操作、维持胚胎干细胞多能性的最佳培养条件以及打靶技术等。第13-15章重点阐述了如何通过将打靶后的胚胎干细胞注射入囊胚或者桑葚胚阶段通过细胞聚集获得嵌合体小鼠的技术手段、将改造后的胚胎重新转入代孕小鼠体内的外科手术。多年来,Cre/loxP和flp/frt重组系统一直很受人们的欢迎,在16章对这两个系统及其在小鼠基因组修饰操作中的应用进行了介绍。17章重点介绍了Cre转基因小鼠的制作和应用。另有一章介绍了大规模的国际间合作以求在基因组中系统性敲除每个基因的工作。本书的其他章节介绍了成功制备转基因小鼠所必备的饲养和繁殖技巧、冰冻保存以及从冰冻状态下复苏小鼠的技术。
《转基因技术—原理与实验方案》一书作为生物技术专业研究读物,观点新颖独到,内容饱满详实、语言浅显易懂,除此之外,还包括一些其他的特点:
1、本书不仅仅是介绍转基因技术的生物学功能,而且将转基因技术与人类疾病的诊断与治疗结合起来。不但让读者在理论上对转基因技术有了更高层次的理解,而且了解了转基因技术研究对人类基因功能的了解据具有重大意义。
2、索引文献丰富,证明了这本书的知识性,真实性。而且,这些索引文献绝大部分都是最新研究,这就是这本书与世界最新研究同步,让读者全面了解该领域的前沿进展。
3、本书还具有很强的专业性,书中的每个章节都是由不同的专业研究人士提供,他们都是致力于该领域的最新研究,让我们在短时间内了解更全面,更专业的资料。
4、在本书的最后,将出现的专业词汇都罗列出来,并予以注解,大大方便了大家对阅读过程中对转基因技术专业术语的认知。
5、本书最鲜明的特点就是,图片生动形象,语言浅显易懂。语言介绍的同时,附上可以说明问题的图片,本来复杂枯燥的知识变得简单易懂,增加了本书的趣味性,对于初学者有很大的帮助。
6、本书最后的特点是,对多种模式生物进行介绍,具有详细的实验操作流程,是一个全面的技术参考书籍。
总的说来,《转基因技术—原理与实验方案》这是一本全面的制作转基因动物的使用手册,同时聚集了该领域专家在具体实践过程中日积累月的心得体会,这些宝贵的经验对于目前正在进行转基因研究的实验室和即将进入该领域的初涉者来说是无价的。本书也为使用转基因动物模型的科学家提供了重要的背景信息。
目录:
第一部分 多种模式动物的转基因技术
1 转基因果蝇
2 转基因线虫
3 利用Tol2转座子系统制作转基因斑马鱼
4 转基因爪蟾
5 利用DNA前核注射制作转基因大鼠
第二部分 小鼠的转基因技术
6 细胞类型特异的转基因小鼠
7 设计转基因载体和DNA转入基因组一成功的关键
8 过表达转基因一前核显微注射
9 基因打靶载体
10 基因捕获:基因敲除的快速通道
11 小鼠胚胎干细胞的培养
12 打靶胚胎干细胞
13 通过显微注射获得嵌合体小鼠
14 通过桑葚胚细胞聚集获得嵌合体小鼠
15 获得突变体小鼠相关的手术操作
16 用于小鼠基因组修饰相关的位点特异性重组酶
17 Cre转基因小鼠
18 大规模小鼠基因突变
19 小鼠的繁殖和饲养
20 维持和保存实验室变异小鼠的生物学方法Ⅰ:保存突变小鼠株
21 维持和保存实验室变异小鼠的生物学方法Ⅱ:复苏突变小鼠株
索引
(武汉大学生命科学学院研究生 张英)