细胞生物学,第115卷:微管的体外研究,第二版----- Methods in Cell Biology: Volume 115, Microtubules, in Vitro, 2nd Edition
作者:John J. Correia(编者),Leslie Wilson(编者)
出版:Academic Press
ISBN: 978-0-12-407757-7
藏书地点: 武大外教中心
《细胞生物学方法》至今共更新至154卷,全面覆盖了用于研究模型发育的生物体、细胞器和细胞系统,以及显微镜和其他分析方法。本书为《细胞生物学方法》系列图书第一百一十五册,主要讲解了微管的体外研究方法。
真核细胞中普遍存在的一种纤维结构,是一种具有极性的细胞骨架。微管是由微管蛋白二聚体组成的长管状细胞器结构,微管蛋白二聚体由结构相似的α和β-微管蛋白构成,两种亚基均可结合GTP,α-微管蛋白结合的GTP从不发生水解或交换,是α-微管蛋白的固有组成部分;而作为GTP酶,β-微管蛋白可水解结合的GTP,结合的GDP可交换为GTP。微管和微丝一样,具有生长速度较快解离速度较慢的正端和生长速度较慢解离速度较快的负端。微管在细胞内起支撑作用,另外它还是两种运载分子,驱动蛋白和运动蛋白的行走轨道。
微管细胞骨架对于维持细胞的形状、强度和组织是必不可少的。它的时空结构是许多动态生物过程的基础,微管细胞骨架内的机械应力为有丝分裂和神经发育提供了重要的信号机制。这就提出了复杂微管结构中结构与力学关系的重要问题。在体外,重组的细胞骨架网络提供了一个最小的细胞力学模型,同时也为刚性聚合物凝胶的基本聚合物物理提供了一个试验场。本书描述了研究者用一个广泛的研究方法来研究结构力学关系重组太网络,包括协议的组装纠缠和交联太网络,荧光成像、显微结构特征,磁性镊子的建设和校准设备和机械的数据收集和分析。
微管的力学特性在过去20年里一直是一个活跃的研究领域,部分原因是理解单个微管的力学有助于整个细胞的刚度和结构的建模,从而更好地理解运动和运输的基本过程。此外,微管结构和微管相关蛋白(MAPs)在微管刚度中的作用尚不清楚。微管正末端示踪蛋白与生长的微管的正末端特异性结合,从而以多种不同的方式确定微管的动态行为。微管正末端示踪蛋白与参与微管正末端轨迹的其他纯化蛋白进行重构,并通过全内反射荧光显微镜分析,有助于阐明一些微管运动的关键机制。
微管脱离微管组织中心是细胞正常增殖的重要过程。当细胞进入有丝分裂时,微管周转率随着微管脱离的增加而增加。MCAK是一种与运动蛋白相关的蛋白质,在有丝分裂的早期阶段含量最高,已被证明可以调节微管的脱离。异常增加或减少微管的脱离频率会干扰纺锤体功能和抑制细胞分裂。已有研究表明,一些促进微管组装的药物(如紫杉醇、环氧酮)可通过抑制微管从中心体上的脱离来阻止细胞分裂。相反,有细胞毒性的破坏微管稳定的药物(如长春花碱,诺考达唑)、具有紫杉醇抗性的微管蛋白突变体、以及特点的β-微管蛋白同型物能增加微管的分离频率。本书描述了一种用EGFP-MAP4转染细胞并通过活细胞成像直接观察微管脱离的方法来计算微管脱离的频率。
除此之外,本书还包含了许多微管体外研究的其他方面,概述了研究微管蛋白的特定荧光标记的生物化生方法,微管蛋白的靶定药物,分析微管蛋白结构的方法,如何借助显微镜进行结构分析,微管蛋白抗体的制备与分析,研究微小RNA调控微管蛋白亚型的方法等等。
《细胞生物学,第115卷:微管的体外研究,第二版》一书于2013年由Academic Press出版,作者为ohn J. Correia,Leslie Wilson。
《细胞生物学,第115卷:微管的体外研究,第二版》一书,作者展现了微管蛋白的体外研究领域中的一些最新研究,讨论的主题主要包括微管的研究,微管相关蛋白的研究,有丝分裂抑制剂的相关研究。
《细胞生物学,第115卷:微管的体外研究,第二版》是生物学实验室不可或缺的工具用书,可作为生物化学、细胞生物学、分子生物学等专业研究人员的参考书籍,亦可供生物医学、药理学、免疫学及相关领域的研究人员参考。
《细胞生物学,第115卷:微管的体外研究,第二版》一书作为生物化学和分子生物学专业研究读物,内容饱满详实、语言浅显易懂,除此之外,还包括一些其他的特点:
1.本书涵盖的方面特别广,涉及到生物化学、物理化学、减数分裂抑制剂药物、酶学、荧光、结构学、显微成像、组装、抗体、分子动力学、信号转导等方面,将微管所涉及到的所有方面的研究方法进行了集中的概述。
2.本书每一章的内容都是由相关领域的权威专家撰写,包含了微管体外研究方法的最新的发展与最前沿的技术。
总的说来,《细胞生物学,第115卷:微管的体外研究,第二版》一书为想要了解微管的体外研究方法的人员提供了清晰的导读路径,作为分子生物学和生物化学领域的一本前沿研究图书,是一本值得为想要涉足该领域的人员推荐的具有指导意义的专业书籍。
本书目录:
撰稿者名单
前言
第1章 微管蛋白位点特异性荧光标记
Kamalika Mukherjee, Susan L. Bane
第2章 使用微管滑动实验测量微管持续长度
Douglas
S. Martin
第3章 地图双角蛋白族的结构研究
Franck
Fourniol, Mylène Perderiset, Anne Houdusse,
Carolyn Moores
第4章 微管脱离中心体和纺锤体的检测和定量
Anutosh Ganguly, Hailing Yang, Fernando Cabral
第5章 微小RNA调控微管蛋白表达:对耐药性的影响
Sharon
Lobert, Mary E. Graichen
第6章 用共聚焦显微镜和基于磁镊的微流变学确定致密微管网络的结构力学关系
Yali Yang, Megan T. Valentine
第7章 研究标准细胞形态中的线粒体和微管定位及动力学
Andrea
Pelikan, James Sillibourne,
Stephanie Miserey-Lenkei, Frederique Carlier-Grynkorn, Bruno Goud, Phong T. Tran
第8章 单枪匹夫:用体外TIRF显微镜测定微管的运动
Kris
Leslie, Niels Galjart
第9章 鱿鱼巨大轴突中分离的轴浆微管的分析
Yuyu Song, Scott T. Brady
第10章 显像结合GTP的微管蛋白:从细胞到体外组装的微管
Hélène
de Forges, Antoine Pilon, Christian Poüs, Franck Perez
章11章 Tubulin-Specific陪伴:组件组装的分子机器的α/β异质二聚体
Guoling Tian, Nicholas J. Cowan
第12章 异三聚体G蛋白和微管
Witchuda Saengsawang, Mark M. Rasenick
第13章 微管切断酶的体外纯化和生物物理分析
Juan
Daniel Diaz-Valencia, Megan Bailey, Jennifer L. Ross
第14章 浊度和荧光法测定体外微管聚合
Matthew
Mirigian, Kamalika
Mukherjee, Susan L. Bane, Dan L. Sackett
第15章 拟南芥微管和微管相关蛋白的活细胞成像
Jessica
Lucas
第16章 研究特定抗体翻译后的微管蛋白修饰
Maria
M. Magiera, Carsten Janke
第17章 细菌微管蛋白BtubA/B的纯化和组装,并构建真核微管蛋白序列
José
M. Andreu, María A. Oliva
第18章 用等温滴定量热法测定微管相关蛋白与微管蛋白的相互作用
P.O. Tsvetkov, P. Barbier, G. Breuzard, V. Peyrot, F. Devred
第19章 研究微管结合位点相互作用的方法:赞帕诺内德作为共价结合剂
Jessica
J. Field, Enrique Calvo, Peter T. Northcote,
John H. Miller, Karl-Heinz Altmann, José Fernando Díaz
第20章 用相关的光电子显微镜研究动态纤维的超微结构
Daniel
G. Booth, Liam P. Cheeseman, Ian A. Prior, Stephen J.
Royle
第21章 基于荧光的微管结构检测
Susanne
Bechstedt, Gary J. Brouhard
第22章 酵母微管蛋白的结构功能分析
Anna Luchniak, Yusuke Fukuda, Mohan L. Gupta
第23章 使用MTBindingSim作为实验计划和解释的工具
Julia
T. Philip, Aranda R. Duan,
Emily O. Alberico, Holly V. Goodson
第24章 成像分裂酵母中单个纺锤体微管动力学
Judite Costa, Chuanhai Fu, Viktoriya
Syrovatkina, Phong T. Tran
索引