应用免疫细胞化学

Applied Immunocytochemistry

 

作者:Rachel Dell

出版:CALLISTO REFERENCE

索书号:Q26/A652/2015 /Y

ISBN: 978-1-63239-076-9

藏书地点:武大外教中心

 

安东尼·范·列文虎克的开创性工作被公认为是对微观物体进行详细研究的第一人,当他观察牛视神经的切面时,他第一次瞥见了神经元。一个多世纪后,意大利科学家卡米洛·高尔基(1843-1926)1873年发明了“黑色反应”,后来被称为高尔基染色法或高尔基法。这种方法揭示了一个迄今未见的世界,在随后的几十年里,Santiago Ramón y Cajal以惊人的方式揭示了一个世界,他改进了高尔基的技术,并发表了许多文章,详细介绍了神经系统的精细结构。这项工作不可避免的结论——神经系统是由离散的细胞单位(或神经元)组成的,它们在一个巨大的网络中相互通信,后来被称为“神经元学说”。正是从这些最初的发现中,今天的科学家所使用的复杂技术得以发展。

Ramón y Cajal工作的一个基本技术方面仍然适用于许多当代技术;在进行任何进一步的处理或可视化之前,组织和细胞的精细结构必须是稳定的,或“固定”的。固定在任何类型的细胞或组织染色中都是至关重要的一步。这也适用于免疫细胞化学(ICC)——使用特定抗体在细胞和组织内标记蛋白质的过程。尽管最初仅限于特异性不明确的纯化血清样本,但这项技术的可能性立即显现出来。只要有一种特异性抗体,就可以看到细胞内几乎所有的蛋白质。

杂交瘤技术的发展产生针对特定蛋白质或其中特定氨基酸序列的单克隆抗体,极大地提高了免疫染色的实用性和普及性;理论上通过细胞培养可以产生无限量的具有相同特异性的抗体。他无疑加快了所有生物医学学科的发现速度。从免疫染色中所能收集到的信息不仅限于某一感兴趣的蛋白质是否存在于特定的细胞或组织区域内。原则上,ICC可以利用抗体来探索蛋白质在其生命周期中所经历的几乎所有过程。这包括蛋白质亚细胞定位的变化,表达的发育或病理变化和/或定位模式与其他蛋白质的关联或解离,甚至翻译后修饰,如糖基化和磷酸化,以及蛋白质生命结束时的降解。

最近的一项发展是利用荧光蛋白,当“标记”到任何感兴趣的蛋白质上时,可以使活细胞内的蛋白质可视化。这使得生物过程的动力学和时间特征得到前所未有的仔细检查,并更多地揭示使神经元等细胞建立和维持稳态的过程。这种方法可以(而且经常)与传统的免疫染色结合使用,这两种技术相互补充。最近,荧光蛋白的独特性质被另一种方式利用,以便在真正的分子水平上探索蛋白质之间的联系,只有当两个具有适当荧光蛋白标签的蛋白质彼此极其接近时,才会发生荧光共振能量转移(FRET)过程,今天的科学家为了探索蛋白质-蛋白质相互作用而利用这一过程。

这些技术使我们能够比以往任何时候都更深入地观察细胞的复杂性,并且无疑仍有很多东西可以告诉我们。正是这些技术,它们的优化,应用和限制,我们打算在这里通过关注在细胞系和神经元中表达的离子通道蛋白作为我们的主要例子来描述。离子通道是一组功能多样化的蛋白质,具有大量密切相关的亚家族成员。此外,对亚细胞定位、蛋白质-蛋白质相互作用和这些蛋白质经历的翻译后修饰的广泛控制意味着它们代表了ICC必须提供的困难和迷人的见解。

免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等) 免疫组化技术近年来得到迅速发展。50年代还仅限于免疫荧光技术,50年代以后逐渐发展建立起高度敏感,且更为实用的免疫酶技术。

Rachel Dell是加拿大一所顶尖医学院的研究教授。她拥有兽医博士(DVM)学位。她的学术和研究兴趣在于干细胞技术和免疫细胞化学方法。她的研究活动产生了180多篇论文和文章,并发表在国际领先期刊上。戴尔与几个科学和医学委员会有关联。她在生物学和医学领域的教学和探索获得了多个奖项。

《应用免疫细胞化学》一书于2015年由CALLISTO REFERENCE出版,作者为Rachel Dell

《应用免疫细胞化学》一书,作者展现了免疫学和生物化学研究领域中关的一些最新研究,讨论的主题主要包括两大部分,第一部分为细胞成分的研究和免疫细胞化学对细胞过程的分析,第二部分为免疫细胞化学的具体应用。

《应用免疫细胞化学》是生物学实验室不可或缺的工具用书,适用于免疫学和生物化学等相关专业的研究生和研究人员高年级本科生、研究生,也可作为教师的教学和科研参考书,亦可对生物医学的研究生和研究人员有用。

《应用免疫细胞化学》一书作为免疫学和生物化学专业研究读物,内容饱满详实、语言浅显易懂,除此之外,还包括一些其他的特点:

1.这本书是对应用免疫细胞化学的简明而复杂的介绍。传统上,免疫细胞化学被描述为通过抗体在细胞环境中研究抗原的过程。但随着时间的推移,该过程的各种属性已经从大量的实验条件中涌现出来。开发给定样本的方法多种多样,应用的抗体种类繁多,成像的技术多种多样,分析信息的程序也多种多样。在这本书中,已经说明了在不同的细胞环境中进行免疫细胞化学的每一个单独步骤的多种方法。本书提供了免疫细胞化学各个层面的实用和背景数据,以及该技术在相关领域的应用及其表现。

2.这本书汇编的研究都是真实的、高质量的,结合了多个学科,来自世界各地不同的地区,借鉴了来自不同国家的许多研究人员的研究贡献。本书的目标是为读者提供该研究领域的最新成果。这本书一定会成为所有对此领域感兴趣和研究的人的知识来源。

总的说来,《应用免疫细胞化学》一书为想要了解免疫细胞化学各个层面的实用和背景数据以及该技术在相关领域的应用的人员提供了清晰的导读路径,作为免疫学和生物化学领域的一本前沿研究图书,是一本值得为想要涉足该领域的人员推荐的专业书籍。

 

本书目录:

前言

第一部分 细胞成分的研究和免疫细胞化学对细胞过程的分析

1 细胞系和神经元中电压门控离子通道的免疫染色-关键概念和潜在缺陷

Elke Bocksteins,Andrew J.Shepherd,Durga P.Mohapatra and Dirk J.Snyders

2 优化神经组织的多重免疫染色

Araceli Diez-Fraile, Nico Van Hecke, Christopher J. Guérin and Katharina D'Herde

3 免疫电子显微镜:细胞过程分析的可靠工具

Ana L. De Paul, Jorge H. Mukdsi, Juan P. Petiti, Silvina Gutiérrez, Amado A. Quintar, Cristina A. Maldonado and Alicia I. Torres

4 新型生物标志物与大鼠脑损伤模型神经退行性变的免疫组化关系

Shyam Gajavelli, Amade Bregy, Markus Spurlock, Daniel Diaz, Stephen Burks, Christine Bomberger, Carlos J. Bidot, Yokobori Shoji, Julio Diaz, Jose Sanchez-Chavez, Ross Bullock

5 细胞骨架蛋白的免疫细胞化学

Arzu Karabay, Şirin Korulu and Ayşegül Yıldız Ünal

6 免疫细胞化学工具揭示硬骨鱼免疫学和生殖生物学边界之间的一个新的研究领域

Alfonsa Garcia-Ayala and Elena Chaves-Pozo

7 免疫细胞化学方法鉴定Na+/ Cl-依赖神经递质转运体的膜拓扑结构

Chiharu Sogawa, Norio Sogawa and Shigeo Kitayama

第二部分 免疫细胞化学的具体应用

8 精子组学:结合免疫细胞化学、代谢组学、蛋白质组学和其他经典分析技术对精子整体功能进行全球调查的新名词

Joan E.Rodriguez-Gil

9 免疫细胞化学在痰细胞中的应用,研究气道炎症的分子机制

Kittipong Maneechotesuwan and Adisak Wongkajornsilp

10 胰腺星状细胞的可塑性可能参与控制胰腺新生过程的机制

Eugenia Mato, Maria Lucas, Silvia Barceló and Anna Novials

11 正常情况下或神经退行性疾病中的雪旺细胞-轴突连接:免疫细胞化学方法

Alejandra Kun, Gonzalo Rosso, Lucía Canclini, Mariana Bresque, Carlos Romeo, Karina Cal, Mariana Bresque, Carlos Romeo, Karina Cal, and José Roberto Sotelo

12 早期哺乳动物胚胎免疫细胞化学

Hesam Dehghani

13 植物细胞免疫糖成像:细胞壁碳水化合物表位及其生物合成酶的定位

Marie-Laure Follet-Gueye, Mollet Jean-Claude, Vicré-Gibouin Maité, Bernard Sophie, Chevalier Laurence, Plancot Barbara, Dardelle Flavien, Ramdani Yasmina, Coimbra Silvia and Driouich Azeddine

14 蛋白酶免疫细胞化学在利什曼原虫生理和宿主-寄生虫相互作用研究中的应用

Raquel Elisa da Silva-López

许可

撰稿者名单

 

 

胡萌欣 武汉大学生命科学学院 博士